La Signora Puff è un personaggio immaginario protagonista della serie animata Spongebob Squarepants.
È una pesce palla, titolare (nonché l’insegnante) della scuola guida di Bikini Bottom.
Il suo allievo peggiore è il protagonista della serie, Spongebob, il quale non riesce mai ad ottenere la patente nonostante abbia sostenuto ben 34 esami;
Puff è terrorizzata quando deve farlo guidare, perchè spongebob riesce sempre a farla impazzire, con una guida spericolata e con incidenti di ogni genere.
In una puntata si fidanza con Mr. Krabs, il quale è diviso tra il desiderio di renderla felice con costosissimi regali e la sua proverbiale avarizia e tirchiaggine;
la loro relazione dura molto poco, i due si lasciano per volontà della Signorina Puff che non vuole essere causa di inquietudine per Eugene Krabs.
Il suo panino preferito, al fast food di quest’ultimo, il Krusty Krab, è il Krubby Patty al formaggio.